中国病毒病杂志发表张平 李顺天 尤炜 陈静【摘要】目的:观察HBIG中和HBsAg的体外与新生儿体内能力,提高出生HBsAg阳性新生儿的治愈率。方法:体外测试HBIG中和HBsAg的能力。观察42例出生静脉血HBsAg阴性新生儿使用HBIG200IU第4~7天体内的抗-HBs量。将出生HBsAg阳性新生儿分为HBsAg≤40ng为Ⅰ组46例,>40ng为Ⅱ组17例。比较不同感染量体内HBIG中和HBsAg能力。结果: 200IUHBIG使用4~7天后能在新生儿体内平均抗-HBs量为226.4U。体外试验1IUHBIG中和HBsAg42ng。Ⅰ组新生儿体内1IUHBIG中和HBsAg2.04ng,Ⅱ组1.87ng。体内外中和能力相差20.5~22.4倍。结论:体内外HBIG中和HBsAg能力存在差别,提示新生儿感染HBsAg在组织与血液分布可能不同。【关键词】HBIG 中和实验 HBsAgThe study of the Capability of HBIG neutralizing HBsAg in vitro test and in vivo【Abstract】objective To observe the Capability of HBIG neutralizingHBsAg in vitro test and in vivo,and increase the curing rate of HBsAg-positive newborns . Methods: Detect the capability of HBIG neutralizing HBsAg in vitro test. 42 newborns with HBsAg-negative基金项目:天津市卫生局科研基金资助项目(05KYZ96)作者单位 :300192 天津市传染病医院通信作者:张平 zhangping@vip.163.comare tested after using HBIG200IU at the 4-7 day, and observe the amount of anti-HBs provided by the HBIG in the newborn,body. According newborn with HBV infection after birth it is divided into groupⅠ:HBsAg≤40ng, 46case;and group Ⅱ:>40ng, 17case. Compare the capability of HBIG neutralization HBsAg in vivo and vitro test. Result:200IUHBIG provide for anti-HBs 226.4U in the body of the newborn with HBsAg-negative after treated 4-7 days.1IU neutral 42ng HBsAg in vitro test. GroupⅠ:1IUHBIG neutral 2.04ng HBsAg,GroupⅡ:1.87ng,the disparity of the neutral capability is 20.5~22.4times between in vivo and vitro. Conclusions:The capability of HBIG neutralizing HBsAg in vitro test and in vivo is different .HBsAg may distribute different in blood and tissue.【Key word】HBIG;neutralization test,HBsAg研究认为儿童感染HBV主要发生在围产期和出生早期[1]。HBsAg阳性母亲所产新生儿出生后24h内使用乙型肝炎疫苗和乙肝免疫球蛋白(HBIG)已在慢性乙型肝炎防治指南中被建议,其保护率达95%左右[2]。目前未见有关HBsAg阳性母亲所产新生儿出生检验及其针对HBsAg阳性新生儿的对策与研究报告。本文通过对体外试验结果在出生HBsAg阳性新生儿的应用发现,体内外HBIG中和HBsAg能力存在差别,提示新生儿感染HBsAg在组织与血液分布可能不同。1 资料与方法1.1 研究对象及分组:2002年10月至2009年2月我院住院HBsAg阳性孕产妇孕足月所产1827例新生儿,新生儿评分9~10分,出生HBsAg阳性新生儿119例,其中63例出生后免疫获得成功(HBsAg、HBVDNA阴性,抗HBs阳性)。根据63例新生儿感染量分为HBsAg≤40纳克为Ⅰ组46例,其中新生儿HBVDNA阳性3例,HBsAg>40纳克为Ⅱ组17例,其中新生儿HBVDNA阳性7例。另有新生儿出生HBsAg阴性42例,用于观察出生使用HBIG后体内产生的抗-HBs量,新生儿HBVDNA均为阴性。母亲年龄25.1±6.6岁。新生儿体重3255.7±436.7g。1.2 检测方法:HBsAg和抗-HBs使用化学发光生化分析仪检测,试剂由美国罗氏公司提供。HBVDNA定量检测采用PCR荧光定量法,试剂由中山医科大学达安生物技术有限公司提供。1.3 研究方法:本研究各组病例均于出生后2小时内取静脉血检测HBsAg,并于取血后即刻用HBIG200单位,24小时内使用乙型肝炎疫苗10微克,于4~7天再次取血复查HBsAg和抗-HBs。HBIG生物半衰期以药品使用说明给出的14天计。1.4 新生儿血液量计算方法:新生儿血液量按85ml/kg计算[3]。1.5 HBIG中和HBsAg体外试验原理及试剂:采用双抗体夹心法进行固相放射免疫检测。乙肝免疫球蛋白(HBIG)由成都蓉生药业有限责任公司提供,国药准字S20013023,批号200309302。HBsAg国家参比品(批号0412)由HBsAg adr亚型0.2ng/ml、HBsAg adr亚型0.5ng/ml、HBsAg adr亚型1.0ng/ml、HBsAg adr亚型2.0ng/ml。RIA检测HBsAg诊断试剂盒(放射免疫法),北京生物制品研究所,批号200506。1.6.1体外实验HBIG的抗-HBs含量表1抗-HBs 检测单位为U/L (浓度),计算200IUHBIG( 2毫升)体外可提供抗-HBs294.2U。(200×735.4÷1000×2=294.2)体外HBIG(IU):抗-HBs(U)约为2:3。表1. 4组体外试验HBIG(U)与检测抗-HBs(U/L)的数值No. 1 2 3 4HBIG(U) 1 0.1 0.01 0.001抗-HBs(U/L) 735.40 76.16 30.24 17.0516.2体外实验HBsAg检测电化学发光S/CO值与纳克关系从表2可计算ng/ml与s/co值的比例12实验组计算系数均为0.0347。表2 体外实验HBsAg检测S/CO值与纳克标定结果实验编号 ng/ml S/CO1 0.2 7.562 0.3 10.43 0.4 13.24 0.5 16.15 0.6 18.96 0.7 21.77 0.8 24.18 0.9 279 1 30.310 2 58.811 3 87.212 4 115.21.6.3 体外试验标定1IUHBIG中和HBsAg的纳克数实验结果测定后利用软件SPSS10.0进行计算,计算值如表4所示,得出ED50的值。测试样品乙肝表面抗原人免疫球蛋白在稀释度为1670倍(1:1670稀释)可以结合50%的乙型肝炎表面抗原(浓度为80 ng/ml)。计算结果:1IUHBIG结合42ugHBsAg。本实验的主要目的在于测定乙肝表面抗原人免疫球蛋白与乙肝表面抗原结合时ED50值,即结合50%的乙肝表面抗原时需稀释乙肝表面抗原人免疫球蛋白至多少倍。实验中使用标准品为200ng/ml,将样品稀释10倍、50倍时,能够很好地结合标准品,但进行继续稀释后结合程度逐渐下降,稀释10000倍时已接近阴性对照。在测定实验中,标准品的浓度对测定ED50会带来影响,并且可以通过测定实验中样品与标准品结合后乙肝表面抗原值来估算ED50值,建议选取较高浓度的标准品。在第一次实验中,由于选择标准品值较低,导致样品的稀释度不能很好的落在ED50值附近,并且不够准确;在第二次实验中,尽管我们选择了高浓度的标准品,但是经测定后发现此标准品并不符合标示浓度,所以导致实验失败;最后,为了得到更准确的测定值,我们将稀释度进行调整,并准确标定标准品浓度,最后得到上述结果,符合要求并准确反映ED50值。表3 HBIG中和HBsAg测定后计算值:单位(ng/ml)排列编号 1(标) 2(标) 3(稀释) 4(稀释)A 0.01 0 0.005 0.25 0.23 0.24B 1.47 0.74 1.105 0.25 0.38 0.315C 2.87 2.61 2.74 0.62 0.55 0.585D 7.27 5.31 6.29 0.60 0.85 0.725E 11.59 11.09 11.34 3.84 4.65 4.245F 22.45 16.04 19.245 17.94 17.69 17.815G 15.61 15.72 15.665H 16.50 15.79 16.1452 结果2.1 体外试验标定1IUHBIG中和HBsAg的纳克数体外1IUHBIG中和HBsAg的纳克数39.85~96.32,取计算均值为1IUHBIG结合42ngHBsAg。2.2 42例出生HBsAg阴性新生儿出生后即刻注射200IUHBIG第4天检测抗-HBs: ±s=365.75±75.578 u/L。新生儿体重: ±s=3642.90±514.199g 。抗-HBs与体重成负相关,系数为-0.56。新生儿体内抗-HBs含量计算公式:检测抗-HBs值(U/L)×新生儿体重(kg)×0.17(85×2÷1000=0.17)。200IUHBIG(2毫升)体内可提供抗-HBs 226.4U。(365.75×3.642×0.17=226.4)2.3 HBIG 在新生儿体内中和HBsAg结果根据体外试验结果,观察新生儿HBsAg静脉血纳克数与HBIG体内提供抗-HBs量的关系,对比体内外HBIG中和HBsAg能力,表1中除例数外数值均为均值,其中①新生儿出生体内HBsAg纳克数计算为:出生静脉血检验HBsAg纳克数值×体重(kg)×85ml。②HBIG用量为新生出生24h内平均使用量(IU)。③新生儿使用HBIG1周体内HBIG余量计算:按新生儿体内抗-HBs含量计算公式所得结果×200÷226.4。④HBIG消耗量计算:226.4×2ml含有200IUHBIG支数-新生儿使用HBIG1周体内HBIG余量。⑤HBsAg/抗-HBsU/L(U)为实用HBIG1周复查HBsAg纳克/检测抗-HBs结果(计算所得体内所含抗-HBs量(U),抗-HBs量(U)为均数。见表1表4 HBsAg纳克、HBIG用量/消耗量及抗-HBs(U/L)/含量(U)组别例数 出生HBsAg(ng)(kg)HBIG用量(IU)/消耗量 1周后HBsAg/抗-HBsU/L(及体内量U)Ⅰ 46 39.3 3.25 200 / 19.3 0 / 370.4(204.6)Ⅱ 17 82.7 3.26 416.7 / 44.2 0 / 771.4(427.5)表5能够体现HBIG体外实验值与临床实际值及其比例关系,HBIG实际需用量较体外实验所需量高20倍以上。表5 HBIG中和HBsAg 体外实验值与临床实际值比较组别HBsAg(ng)HBIG体外量(IU) HBIG实际量(IU) 体内外HBIG中和HBsAg能力比Ⅰ 39.3 0.94(1IU:42ng) 19.3(1IU:2.04ng) 1:20.5Ⅱ 82.7 1.97(1IU:42ng) 44.2(1IU:1.87ng) 1:22.4体外测定的HBIG中和HBsAg能力为1IU:42ng为理论值;Ⅰ组病例体内中和能力为1IU:2.04ng(39.3/19.3);Ⅱ为1IU:1.87ng(82.7/44.2)。3 讨论乙型肝炎病毒母婴传播是新生儿出生后乙肝计划免疫失败后的主要原因[4-5]。本研究HBIG中和HBsAg体外试验需用量与新生儿实际需用量比较,由表5可见,新生儿出生血液检测的HBsAg量,根据体外试验1IUHBIG中和42ngHBsAg的结果使用HBIG,4~7天复查显示实际HBIG需用量是体外试验需用量的20.5~22.4倍。其原因①体外实验与体内实际环境存在一定差别,就免疫中和试验而言,体内有补体等免疫因素的参与下,HBIG中和HBsAg的作用应增强而不太可能减弱。②新生儿HBsAg不仅存在于在血液中,可能组织中是其存在的重要场所。本研究病例全部产后24小时内用乙型肝炎疫苗10微克,产后4小时内用HBIG200单位,2010年12月版的慢性肝炎防治指南[2]推荐的方法是产后24小时内用HBIG≥100单位,用法经天津市卫生局专家评审及伦理委员会讨论通过。上世纪80年代Lauchart W, McGory RW等提出增加抗-HBs可减少血循环中的HBsAg水平[6-7]。Mutimer D等提出肝移植后用Lamivudine结合大剂量HBIG预防再感染优于单一预防效果[8-9]。在肝移植术后的病人,即使切除了病毒复制的最大根源肝脏,仍需提前使用核苷类似物及术后HBIG大剂量、连续给药使其血清浓度达到100~500 IU/L才有保护作用[11-12]。Jens Rosenau等报道,18例肝移植后HBsAg在0.12~12990IU/ml(平均1706IU/ml),使用HBIG期间HBsAg可减低到0.05IU/ml以下(低于检出值),HBIG剂量10,000~80,000IU(平均33,330IU),每天10,000IU。16例HBsAg持续阴性28.4~63.2月,12例HBVDNA阳性患者术后8周内阴转,另4例HBsAg阴性,HBVDNA持续阳性。尤其是肝移植后最初使用HBIG的数小时内,外周血HBsAg和HBVDNA的消长与进入血循环的HBIG相一致,持续用HBIG抑制HBV的再感染是有益的[10]。Marzano A等报告了肝移植者HBV载量与术后再感染相关[11]。本研究表5结果与Jens Rosenan等研究存在一定的相关性。体外实验与体内实际环境存在一定差别,就免疫中和试验而言,体内有补体等免疫因素的参与下,HBIG中和HBsAg的作用应增强而非减弱。即使将新生儿使用HBIG过程当中的消耗量考虑进去,结果仍提示了组织可能才是HBV存在的主要场所,血液检测的结果可能只是反应病毒存在的表象而已。研究结果可能对HBV的宫内感染诊断、孕期使用HBIG的作用[12]、抗病毒治疗、预防肝移植后再感染等有一定的参考价值。主要参课文文献1、 Vranck R。Alisjahbana A,Mehens A, et al. Hepatitis B virus vaccination and antenatal transmission of HBV markers to neonates.J Viral Hepat.1999.6 (2):1352、 慢性乙型肝炎防治指南 2010.12.10.北京发布。3、 胡亚美,江载芳主编,诸福棠实用儿科学 人民卫生出版社出版 2003年11月第7版,367-368.4、Roberto DF,Antoine H,George KK et a1.East international consensus conference on hepatitis B.J of Hepatology,2003,389 (9):5335、Gripon P,Rumin S.Infection of a human hepatoma cell line by hepatitis B virus.Prec Natl Acal Sci USA,2002,99 (24):156556、Mcgory RW, Ishitani MB, Oliveira WM, et al. Improved outcome of orthotopic liver transplantation for chronic hepatitis B cirrhosis with aggressive passive immunization. Transplantation 1996;61:1358–1364.7、 Mutimer D, Dusheiko G, Barrett C, et al. Lamivudine without HBIG for prevention of graft reinfection by hepatitis B: long-term follow-up. Transplantation 2000;70:809–815.8、Trautwein C.Mechanisms of hepatitis B virus graft reinfection and graft damage afterlivertransplantation.JHepatol,2004;41:362-369.9、Zoulim F. Hepatitis B virus Resistance to Antivirals : ClinicalImplications and Management . J Hepatol , 2002 , 36 : 799280410、Jens Rosenau, Therese Kreutz, Matthiawa Kujawa,et al. HBsAg level at time of liver transplantation determines HBsAg decrease and anti-HBs increase and affects HBVDNA decrease during early immunoglobulin administration. Journal of Hepatology 2007 ;46:635-644.11、Marzano A, Gaia S, Ghisetti V, et al. Viral load at the time of liver transplantation and risk of hepatitis B virus recurrence. Liver Transpl 2005;11:402–409.12、张平 朱理珉,张玉荣 等 孕期乙肝病毒宫内感染的临床观察. 天津医药,2004,32(4):217~218.
已在中华传染病杂志发表2010年11月 第28卷 第11期阻断HBV父婴传播的临床研究张平△ 陆伟 孙茜 刘颖 刘学兰近年来的研究表明,HBV除存在母婴传播外,还存在父婴传播。通过大量的临床观察发现,父婴传播率差异较大。通过对HBsAg阳性的男子精液检验发现了HBV传染物质的存在,以精子为载体,携带到卵内的HBV基因能够在胚胎细胞中复制和表达,提示HBV能够通过男性生殖细胞由父亲垂直传递给子代 [1~2]。本研究通过提高HBV感染者的配偶抗-HBs水平进行阻断父婴传播的观察,现将结果报告如下。对象与方法一、治疗组病例来源于天津市传染病医院2000年5月至2009年5月门诊患者168例,年龄21~40岁,已知HBV感染史3个月~21年,全部HBsAg阳性,其中HBVDNA阳性77例,占45.83%,肝功能异常26例,占15.48%,168例配偶中抗-HBs阳性99例,占58.93%,其中抗-HBs>400U/L21例,占21.21%。对照组病例来源于天津市人民医院妇产科,2004年1月至2008年6月筛选出的慢性HBV感染父亲143例,年龄23~38岁,已知HBV感染史1~26年,均为HBsAg阳性,其中HBVDNA阳性64例,占44.75%,肝功能异常12例,占8.39%,配偶血清HBV血清标志物及HBVDNA均阴性。二、标本采集 2组分别于孕前检测父亲HBV血清标志物及HBVDNA,配偶检测抗-HBs。2组新生儿出生后即刻检测静脉血HBV血清标作者单位: 300192 天津市传染病医院 通信作者:张平 ,Email:zhangping@vip.163.com 志物及HBVDNA。三、 检验及研究方法 2组HBsAg 、抗-HBs(U/L)定量检验使用电化学发光生化分析仪,试剂由罗氏公司(美国)提供。HBVDNA检测:采用PCR荧光定量法,试剂由中山医科大学达安生物技术有限公司提供。治疗组配偶(准母亲)于孕前检测抗-HBs定量,对抗-HBs<400U/L者注射乙型肝炎疫苗,达到抗-HBs≥400U/L可怀孕。对照组配偶孕期检测抗-HBs均<10U/L(阴性),HBVDNA阴性已怀孕。四、新生儿感染标准 新生儿出生后血清HBV-DNA和(或)HBsAg阳性。统计学方法:卡方检验。结果治疗组168例配偶于孕前抗-HBs全部达到400 U/L以上,指导怀孕后复查抗-HBs,部分出现下降但仍为阳性。治疗组168例新生儿HBV-DNA和(或)HBsAg全部阴性;抗-HBs阳性。 对照组143例新生儿血清中检测出HBVDNA和HBsAg阳性27例,阳性率18.9%。27例HBVDNA阳性新生儿父亲中24例HBVDNA阳性,阳性率88.9%。2组新生儿阻断效果比较 附表 病例数 配偶抗-HBs(U/L) 新生儿感染数(%)治疗组 168 抗-HBs>400 U/L 0(0%)对照组 143 抗-HBs阴性 27(19.9%)2组新生儿HBV感染率比较χ2=34.74,P<0.01。2组比较有显著性差异。讨论早在上世纪8O年代就有人在人卵细胞、各级生精细胞及成熟精子中检出HBVDNA[3]。随后有人用显微注射技术把HBV DNA注入小鼠受精卵,将HBVDNA传给F1子代并使F1表达HBsAg和HBcAg 。而在正常人精子俘获HBVDNA的实验中发现,l0% 的精子HBVDNA为阳性。且HBVDNA在精子内的分布与其他乙肝患者相似。提示这种俘获过程中精子是主动的[4]。有的用乙型肝炎患者的精子与去透明带金黄鼠卵受精,在人精子染色体标本可见病毒探针的杂交信号。证实了在受精过程中,整合了HBV DNA的人精子不会受到选择性的淘汰,它能顺利完成受精过程[5]。这些研究为父婴的垂直传播途径的可能性提供了重要依据。有学者从HBV感染的父亲而配偶无感染的流产胎儿组织和血清中检测出HBVDNA。在l6对HBV感染的父亲及受感染胎儿中测定HBV血清型均为adw,并分析父与子所携带的HBVS基因片段,同源性高达98%~100% 。从分子水平证明了出生前期HBV父婴传播的存在[6-8]。精子携带HBV是父婴传播的基础。本研究结果显示,配偶是否抗-HBs阳性及其水平是能否阻断父婴传播的关键。周晓辉等[9]对230例父亲HBsAg阳性母亲血清标志物阴性观察,发现其新生儿感染率19.1%,本研究对照组结果与之类似。治疗组168例母亲抗-HBs均达到400U/L以上,其新生儿HBV感染率为0;新生儿全部HBsAg阴性而抗-HBs阳性。可见出生后只需用被动免疫即可。母亲孕前足够量的抗-HBs可以完全清除胎儿来自父亲的HBV感染因素。因此,男性HBV感染者孕前检测配偶HBVM是十分必要的,对抗-HBs阴性或低于400U/L的配偶,注射乙型肝炎疫苗使其抗-HBs≥400U/L再怀孕,即使胎儿受精的精子携带HBV,从本研究结果可推断有抗-HBs≥400U/L水平,也可为新生儿提供保证。此方法简便经济,对阻断HBV父婴传播安全有效,有一定的推广价值。另外,男性HBV感染者的配偶抗-HBs阳性却低于400U/L,是否会发生HBV父婴传播,能够有效阻断HBV父婴传播的配偶抗-HBs最低值还需进一步研究。参考文献[1]黄天华; 谢庆东; 陈霓彤等 精子携带的乙肝病毒基因在金黄地鼠胚胎中的复制与表达 癌变·畸变·突变 2005.07.30; 17:193-197[2]张清健; 谢庆东(综述); 黄天华(审校) 乙型肝炎病毒垂直传播新途径的研究 癌变·畸变·突变 2003.04.30; 15: 121-124[3]Hadchouel M,Scottp J,Huret JI,et a1.Prcsenee 0f HBVDNA in spematozoa;a possible vertical transmission 0f HBV via the germ line.J Med Viral,1985,16:61—66.[4]黄建民,黄天华,陈晓虹,等.乙型肝炎病毒DNA在肝炎患者精子染色体上的整合.中华医学遗传学杂志,1999,16:272—272.[5]J Araki K,Miyazaki JI,Hinbo O,et a1.Expression and rep—lication 0f B virus geneme in transgeniemice.Genetics,1989,96:207.[6]周思亮,赵连三,黎飞,等.乙型肝炎患者卵细胞中检出HBV DNA.遗传与疾病,1989,6:46.[7]王珊珊,姜普林,彭桂福,等.乙型肝炎病毒的父儿传播与肝外定位.中华肝脏病杂志,1999,7:203—206.[8]王珊珊,李文玲,彭桂福,等.父婴传播的乙型肝炎病毒s基因进化树分析.中华医学杂志,2003,83:451—454 .[9]周小辉,王莹 ,温小丽等 乙型肝炎病毒父婴传播的流行情况研究 汕头大学医学院学报, 2005 ,18: 214~215
中华肝脏病杂志发表人乙型肝炎免疫球蛋白定量清除新生儿HBsAg的临床研究张平* 陆伟 李顺天 尤炜 张玉荣 陈静【摘要】目的:根据新生儿出生时HBsAg和HBV DNA的载量,调整人乙型肝炎免疫球蛋白(HBIG)使用量,更有效的阻断乙肝病毒的母婴传播。方法:新生儿出生2h内静脉血HBsAg阳性125例,研究组64例,对照组61例,研究组根据新生儿出生HBsAg感染量调整HBIG使用量,与对照组比较新生儿12月龄以上治疗效果。结果:2组新生儿出生时HBsAg和HBVDNA检测值2组数据的秩和检验分别为Z=1.381,P=0.167和Z=0.700,P=0.484,差异均无统计学意义。研究组HBIG定量清除新生儿HBsAg的12月龄以上的效果与对照组比较,Chi-Square=9.696,P=0.002,存在统计学差异。结论:根据新生儿的HBsAg感染量调整使用HBIG,可提高乙肝母婴传播的阻断成功率。【关键词】HBIG 清除 新生儿HBsAg The clinical research of quantitative eliminating the HBsAg of newborn by HBIG【Abstract】objective:To protect the transmission of the hepatitis b virus from mother to newborn by adjusting HBIG usage according to the infection dose of HBsAg and HBVDNA of the newborn. Method:125 case were HBsAg-positive from venous blood testing within 2h after the birth,study Group64cases,control group61cases,the newborn of the 基金项目:天津市卫生局科研基金资助项目(05KYZ96)作者单位 :300192 天津市传染病医院通信作者:张平 zhangping@vip.163.comstudy group adjust HBIG usage according to the infectious dose of HBsAg ,compared therapeutic effect of neonatal over 12 months with the control group。Result:2 Group newborns detected when HBsAg and HBVDNA value of 2 sets of data were rank sum test Z = 1.381, P = 0.167 and Z = 0.700, P = 0.484, not statistically significant. Therapeutic effect of neonatal over 12 months in the two groups has significant difference,Chi-Square=9.696,P=0.002. Conclusion:According to neonatal infection dose of HBsAg adjusting HBIG usage can improve the success rate of protecting the transmission of hepatitis b from mother to newborn。【Key Word】HBIG ;Eliminate; HBsAg of the newborn我国儿童感染HBV多发生在围产期和出生早期,主要是垂直传播[1] 。本研究新生儿均为HBsAg阳性母亲所产并于出生后2h内取静脉血检测HBsAg和HBVDNA载量,将HBsAg阳性新生儿作为研究对象,及时检测被动免疫效果调整HBIG用量,并观察HBsAg阳性新生儿与其母亲HBVDNA载量的关系,提供根据母亲HBVDNA载量需重点及时检测其新生儿的依据。用此定量方法对部分出生HBsAg阳性新生儿进行救治,取得了较好的阻断效果,现报道如下。资料与方法1. 研究对象:2002年10月-2009年2月我院住院HBsAg阳性孕产妇孕足月所产新生儿,出生2h内静脉血 HBsAg阳性和(或)HBVDNA阳性。研究组新生儿927例,Apgar评分9.38±0.49;体质量(g)3458.67±374.93;母亲年龄(岁)26.33±3.63。对照组新生儿844例,Apgar评分9.37±0.48;体质量(g)3558.61±322.85;母亲年龄(岁)25.33±3.03。2组比较t值分别为0.023、 1.593、1.669,P值分别为0.981、0.114、0.098。两组新生儿评分、体质量以及母亲年龄比较,差异无统计学意义。2. 研究对象分组:研究组母亲927例(2002.10~2007.7),对照组844例(2007.8~2009.2)。研究组母亲HBVDNA阳性415例,其中HBVDNA≥106138例,出生HBsAg阳性新生儿64例。对照组母亲HBVDNA阳性380例,其中HBVDNA≥106126例,出生HBsAg阳性新生儿61例。2组比较x2值分别为0.012、0.001、0.070,P值分别为0.914、0.977、0.791。2组母亲HBVDNA载量及其新生儿HBsAg阳性率无差异。3.诊断标准①母亲HBV感染诊断标准:HBsAg阳性或(和)HBVDNA阳性。②新生儿出生感染诊断标准:新生儿出生2h内静脉血 HBsAg阳性或(和)HBVDNA阳性。③新生儿最终感染诊断标准:12月龄以上(到5岁)HBsAg、HBeAg及HBVDNA持续阳性,抗-HBs阴性。④阻断成功判定标准:以新生儿12月龄以上(到5岁)持续抗-HBs阳性,HBsAg、HBeAg及HBVDNA持续阴性[2]。 4.检验方法:HBsAg和抗-HBs使用电化学发光生物化学分析仪检测,试剂罗氏公司提供。HBVDNA定量检测采用PCR荧光定量法,试剂由中山医科大学达安生物技术有限公司提供。5.研究方法:2组新生儿均于出生后2h内取静脉血检测HBsAg和HBVDNA定量值(本研究主要以HBsAg作为观察指标,因 HBIG与HBsAg对应。HBVDNA是重要的参考指标)。并于取血后即可注射HBIG200U,乙肝疫苗10微克。1周结果回报:(1)HBsAg阴性者按照慢性乙型肝炎防治指南提供的指导意见处理;(2)HBsAg阳性者即刻再次取血复查:①2组结果HBsAg阴性而抗-HBs阳性者说明感染量较少且已被清除,接下来按(1)处理。②研究组结果HBsAg仍阳性但其定量值较初次检验时有所下降者,计算用药前后HBsAg减少量与HBIG用量比例关系,并据此计算后续HBIG中和剩余HBsAg的需要量,在1周内分次用足量,再次复查新生儿HBsAg和抗-HBs,直至HBsAg阴转而抗-HBs。③研究组用药后HBsAg仍为阳性且其定量值没有减少反而有所增加者,即HBsAg的产生量和速度大于HBIG对其的中和能力,视为免疫失败。乙型肝炎疫苗2组使用剂量和方法相同。观察2组的最终感染率。另附研究组5例典型阻断成功报告,现已3岁以上。6. 统计学处理:将数据录入统计软件 SPSS13.0,计量质量非正态分布采用秩和检验,计数资料采用Chi-Square检验。结果1. 2组新生儿出生HBsAg和HBVDNA检测数据的秩和检验分别为Z=1.381,P=0.167和Z=0.700,P=0.484,均无统计学意义。2. 研究组出生HBV感染新生儿64例,12月龄以上成功清除HBsAg53例,成功清除率为82.8%。对照组出生HBV感染新生儿61例,12月龄以上成功清除HBsAg35例,成功清除率为57.4%。2组出生HBV感染新生儿12月龄以上清除HBsAg效果比较,Chi-Square=9.696,P=0.002,存在统计学差异。3. 本研究病例母亲HBVDNA≥106 组264例 ,其新生儿出生HBsAg阳性114例,HBsAg阳性率43.18%,母亲HBVDNA<106组1507例,其新生儿出生HBsAg阳,11例,HBsAg阳性率0.73%,2组新生儿出生HBsAg阳性率比较,Chi-Square=425.770,P=0.000,存在统计学差异。4. 研究组定量清除HBsAg成功5例典型病例报告,见附表。附表 5例新生儿出生时感染情况、HBIG用量及效果编号 病案号 HBsAg HBeAg HBVDNA 1周HBIG 即刻抗-HBs 后继HBIG 12月龄抗-HBs1 64645 80.95 65.51 7.9×103 600 788.9 200 631.32 68583 86.34 32.04 1×104 800 >1000 800 >10003 68218 187.3 31.76 3.4×104 1200 789.3 1800 >1000 4 67507 462.4 1702 2×103 2800 >1000 400 >10005 62210 326.3 613.3 4.9×104 2000 >1000 1200 >1000注:表2中单位HBsAg、HBeAg:S/CO;HBVDNA:copies;HBIG:IU;抗-HBs:U/L。1周HBIG:为新生儿出生1周内HBIG用量;即刻抗- HBs:使用HBIG后第4天复查抗- HBs;后继HBIG:出生第8~30天HBIG用量;12月龄抗- HBs:12月龄抗- HBs检测结果同时检测HBsAg、HBVDNA均阴性。讨论目前对HBV感染母亲所产新生儿免疫均采用慢性乙型肝炎防治指南建议的出生后24h内尽早注射HBIG≥100IU,同时在不同部位接种10ug重组酵母或20ug中国仓鼠卵母细胞(CHO)乙肝疫苗。也建议在出生后12h内先注射1针HBIG,1个月后再注射第2针HBIG,并同时在不同部位接种1针10ug重组酵母或20ug中国仓鼠卵母细胞(CHO)乙肝疫苗。间隔1和6个月分别接种第2和第3针乙肝疫苗。可对95%的新生儿提供保护。从各地报道的阻断效果来看保护率也在95%左右[3]。这种HBV感染母亲所产新生儿的常规免疫方法对于没有感染HBsAg或少量感染是有效的,也就是新生儿总感染量尚没有超出200IUHBIG的中和能力。从肝移植后HBIG防治再感染HBsAg和抗-HBs水平的消涨情况来看,用药早期可使HBsAg阴转,抗-HBs可清除血循环中的HBsAg,但随着抗-HBs水平的下降HBsAg会再次转阳,所以HBIG与lamivudine联用再感染率低于单一疗法[4-5]。Jens Rosenau1等报告了在肝移植后大量使用HBIG时不仅HBsAg下降,HBVDNA同时也在大幅度的减少甚至于阴转[6]。HBIG的主要成分是抗-HBs,特异性的针对HBsAg发挥作用,而HBsAg与HBVDNA很强的关联性,故本研究以新生儿的HBsAg作为观察指标,HBVDNA作为极其重要的参考指标。附表中5例感染较为严重的新生儿其HBVDNA均在105以下,HBVDNA高于此值尚无阻断成功的病例,可见出生后是否能够彻底清除HBV还与新生儿的感染量和程度有关[7]。本研究显示新生儿出生HBsAg阳性与其母亲的HBVDNA在量有关,母亲HBVDNA≥1×106者是其新生儿出生HBsAg阳性的高危因素,与以往报道结果类似[8],对如此高病毒载量母亲所产新生儿应在出生后及时检测并作相应的处理,以提高阻断成功率。附表中5例新生儿感染较为严重,如按常规的被动免疫极有可能会免疫失败,而利用逐步增加HBIG用量的方法清除HBsAg,最终也达到了免疫成功的目的。本研究将2组出生HBsAg阳性新生儿的HBsAg和HBVDNA感染量无统计学差异(Z=1.381,P=0.167和Z=0.700,P=0.484),采用HBIG定量清除新生儿HBsAg,研究组12月龄以上感染率低于对照组(P<0.002)。原因在于研究组根据新生儿的感染量以及使用HBIG后的HBsAg变化情况,及时复查检测HBsAg的清除效果,再次调整增加HBIG用量。当新生儿首次使用HBIG后复查HBsAg无减少时,考虑新生儿产生HBsAg的速度高于中和的速度,应考虑免疫失败放弃进一步治疗。当新生儿HBsAg量随HBIG用量的增加而减少时,可继续加大HBIG用量,并及时复查直到其完全消失并检测到抗-HBs,附表中5病例现均已3岁以上,仍抗-HBs阳性。有关出生HBsAg阳性新生儿的救治研究目前尚未见报道,出生HBsAg阳性新生儿的HBsAg在血液与组织中的分布比例、HBIG有效清除HBsAg的临界值等需进一步研究。主演参考文献[1] EASL Jury.EASL Intemational Consensus Conference on Hepatitis B.13—14 September,2002:Geneva,Switzerland.Consensus statement(short version).J Hepatol,2003,28:533-540.[2]全国病毒性肝炎会议.病毒性肝炎防治方案.中华传染病杂志,2001,19(1):56—62.[3]慢性乙型肝炎防治指南 2010.12.10.[4]Yuan J,Lin J,Xu A,et a1.Antepartum immunoprophylaxis of three doses of hepatitis B immunoglobulin is not effective:a singlecentre randomized study.J Viral Hepat,2006,13:597 04.[5]Marzan A, Salizzoni M, Debernardi-Venon W, et al. 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天津市传染病医院 张平 张玉荣 李伟 陈静 郝金玉 国心【摘要】目的:探讨乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)感染孕妇分娩的新生儿宫内从母体获得的HBV标志物和HBVDNA 程度分型临床意义,旨在有效的阻断乙肝病毒的母婴传播。方法:检测HBV感染孕妇分娩的831例新生儿产后2h内静脉血的乙肝病毒标志物,根据获得的不同HBV标志物和HBVDNA 状态将其分为5型,各型使用不同剂量的乙肝免疫球蛋白和乙肝疫苗免疫,于产后7~8个月龄时复查。分型免疫组665例,对照组166例。结果:分型免疫组7~8个月复查新生儿HBV感染情况与对照组存在显著性差异,(P<0.05)。结论:分型针对性免疫效果优于一般免疫效果,可进一步降低HBV感染者分娩的新生儿的感染率。关键词 新生儿 乙肝免疫球蛋白 分型免疫The Study of New Born of Suffering HBV to be in Particular Immunization ZHANG Ping,ZHANG Yurong,LI Wei,CHEN Jing,HAO Jingyu,GUO XinAbstract Objective: In order to cut off validly HBV from mother to new born , it is divided into different types according to the embryo acquired HBV-markers and HBVDNA degrees to Particular Immunization . Method: HBV-markers and HBVDNA are tested for 831 now born from 825 HBsAg positive mothers within 2 hours and divided into 5 types in order to running several particular immunization methods of HBIG(hepatitis B immunity globulin) and hepatitis B vaccine. 665 new born as a treatment group and contrast group 166 are repetition test in 7~8 month old. Result: The immunity effect are significant different between the treatment and Contrast groups (P<0.05). Conclusion: The effect of According divided into different types Particular Immunization is better than others. It is a important step to prevent HBV from mother to them infants effectively.key words new born HBIG(hepatitis B immunity globulin) in particular immunization 母亲可经垂直传播或水平传播使婴儿感染HBV。胎盘渗漏[1、2]和胎盘感染[3]是宫内传播的2种可能方式。围生期传播是婴儿HBV感染的重要方式。HBsAg阳性婴幼儿2/3来自HBV的水平传播。小儿HBV感染的发展取决于感染的途径和时间,垂直感染后有较高的慢性携带率,因而具有更重要的流行病学意义。 HBsAg阳性母亲的子女中HBsAg检出率30%~40%;而HBsAg阴性母亲的子女中低于10%。所有无症状病毒携带者中, 由母婴传播形成的近20%[2]。本文将831例HBsAg阳性孕妇所产新生儿获得乙肝病毒标志物的状态分型,并按不同的乙肝病毒标志物状态给予不同的免疫方法,取得了较好的免疫效果。现将研究结果报告如下:对象与方法1 对象与方法: 1.1 对象 患者为 2000年1月至2003年2月天津市传染病医院妇产科收治的HBsAg阳性的产妇825例(新生儿831例),初产妇746例;经产妇79例。平均年龄25.6±6.67(χ±)岁。诊断符合2000年9月西安全国病毒性肝炎会议修订的标准。HBsAg阳性为入选标准。新生儿831例中双胞胎6例,男420例、女411例。新生儿评分5~10分。以新生儿生后2小时左右取新生儿股静脉血检验乙肝标志物(乙肝五项)和HBV-DNA定量结果,分为5种状态。Ⅰ型抗-HBe和(或)抗-HBc阳性,HBV DNA阴性。Ⅱ型HBeAg阳性和(或)抗-HBc阳性,HBV DNA阴性。Ⅲ型HBsAg阳性和(或)HBeAg阳性和(或)抗-HBc阳性,HBV DNA阴性。Ⅳ型HBsAg阳性和(或)HBeAg阳性和(或)抗-HBc阳性,HBV DNA<1×105copies/ml。Ⅴ型HBsAg阳性和(或)HBeAg阳性和(或)抗-HBc阳性,HBV DNA≥1×105copies/ml。以HBsAg和(或)HBVDNA阳性为乙肝病毒宫内感染诊断标准。831例新生儿分为2组,即常规免疫组及分型免疫组。常规免疫组新生儿为2001年1月1日以前出生共166例,分型免疫组为2001年1月1日以后出生共665例。2组新生儿出生后检测的乙肝五项和HBV-DNA定量状态无显著性差异(χ2=0.0044, P>0.05)。1.2方法1.2.1分型免疫方案 常规免疫组采用国内常用的联合免疫即新生儿产后24小时内注射HBIG 200单位,之后按0、1、6月注射相同剂量,此外产后15天开始按0、1、6月注射乙肝疫苗,10μg/次。分型免疫组的分型标准见表1表1 新生儿获得的乙肝标志物和HBVDNA的⑤种状态①抗-HBe和(或)抗-HBc阳性,HBV DNA阴性②HBeAg阳性和(或)抗-HBc阳性,HBV DNA阴性③HBsAg阳性和(或)HBeAg阳性和(或)抗-HBc阳性,HBV DNA阴性 ④HBsAg阳性和(或)HBeAg阳性和(或)抗-HBc阳性,HBV DNA<1×105copies/ml⑤HBsAg阳性和(或)HBeAg阳性和(或)抗-HBc阳性,HBV DNA≥1×105copies/ml新生儿在子宫内获得的HBV抗原不同,生后免疫所用的HBIG剂量也不相同,分型免疫方案为:① HBIG 200单位 分别于产后0、1、4、6月各1次。 ② HBIG 200单位 每月1次,连用2月。 ③ HBIG 200单位 每14天1次,连用2月 ④ HBIG 200单位 每周1次,连用2月 ⑤ HBIG 200单位 每5天1次,连用2月②~⑤用HBIG 2月复查后再重新分型。乙肝疫苗用法各组相同组。3.1 观察方法 于新生儿7~8月龄抽取其静脉血,检测乙肝五项和及HBV- DNA定量值。比较常规免疫组及分型免疫组的免疫效果。3.2 检测方法 HBV标志物检测:ELASA法,仪器与试剂均由罗氏公司提供。HBV-DNA检测:采用PCR荧光定量法,试剂由中山医科大学达安生物技术有限公司提供。3.3 资料统计学处理:卡方检验、精确卡方检验。结 果表6 分型免疫与常规免疫组各型分布及所占比例 分型免疫组(%) 常规免疫组(%) 合计(%) ①型 461(69.32) 125(75.30) 586(70.52)②型 106(15.94) 16(9.64) 122(14.68)③型 54(8.12) 16(9.64) 70(8.42)④型 38(5.71) 7(4.22) 45(5.42)⑤型 6(0.90) 2(1.20) 8(0.96)例数合计 665 166 8314、2常规免疫组和分型免疫组新生儿到7~8个月龄复查时,2组免疫效果比较(见表7)。表7 2组各型新生儿7~8个月龄复查免疫效果比较 ①~⑤型 未感染/ 感染总例数 ①型 ②型 ③型 ④型 ⑤型 常规免疫 166 125 / 0 16/ 0 15 / 1 3 / 4 0 / 2 分型免疫 665 461 / 0 106 / 0 54 / 0 37 / 1 3 / 3 合 计 831 586 122 70 45 8P 值 P=1.0﹡ P=1.0﹡ P=0.2286﹡ P=0.001﹟ P=0.3571﹡﹡无统计学意义;﹟经处理有统计学意义。表8 分型免疫与常规免疫新生儿7~8个月龄复查结果比较 新生儿数 新生儿出生感染数 7~8月龄感染数 感染率%常规免疫组 166 25 7 4.27分型免疫组 665 98 4 0.60P值 χ2=13.29, P <0.01分型免疫与常规免疫在新生儿7~8个月复查时效果明显不同,χ2=13.29, P <0.01,差异有统计学意义。 讨 论国内外研究表明,乙肝疫苗单用或联合HBIG阻断HBV母婴传播是安全有效的。单用乙肝疫苗保护效果>75.0%,联用HBIG,保护效果高达95.0%[4]。且国内外一致认为:乙肝表面抗体水平>10 IU/ml已具有保护能力。对获得一定表面抗体的新生儿注射少量乙肝疫苗,则可产生继发免疫反应,较原发免疫反应所产生的抗体出现时间早、滴度高,预防HBV感染更为可靠,因为HBIG可能聚合HBsAg的作用从而增强乙肝疫苗的免疫原性,激发起更强的免疫应答[5]。 目前我国主要使用基因重组疫苗,每次5ug,按0、第一月、第六月程序接种。对HBsAg阳性母亲的新生儿,其第一针接种要尽早进行。对HBsAg阳性孕妇所生新生儿推荐主被动联合免疫。国外多要求对所有HBV携带母亲的婴儿主被动联合免疫,即出生12小时内注射HBIG 0.5ml(100U),同时不同部位注射乙肝疫苗[6]。北京和上海等地对单用疫苗或不同方案联合HBIG对母婴传播阻断效果的比较研究发现联合免疫的保护效果优于单用疫苗,保护率可达80%以上。本文在新生儿娩出后2小时左右,尚未使用任何药物的情况下,取其股静脉血检验HBV-M和HBV DNA,将新生儿在子宫内接受母亲的乙肝病毒抗原和抗体情况分成不同的状态。根据新生儿不同的状态,采取不同的免疫方法。宫内感染发生的机遇及程度受很多因素影响,母亲的感染程度是重要因素之一。不考虑新生儿宫内感染程度用统一的常规免疫方法对新生儿进行免疫,会影响免疫效果。本研究的创新处在于对已经获得了母体乙肝病毒抗原HBsAg和(或)HBVDNA 侵袭的新生儿,进行针对性地主、被动性的免疫治疗。研究结果显示第④型宫内感染状态的常规免疫与分型免疫存在高显著性差异(P=0.001)。第③和⑤型经过分型免疫于第7~8个月复查时,总绝对数来看是有效的,但经过卡方精确检验显示无统计学意义,考虑与观察的病例数较少有关,有关这方面的观察研究还增加病例数。如表4所示第⑤型宫内感染程度最为严重,加大HBIG的用量也没有显示出统计学意义。如表2所示第⑤型新生儿所占的比例较小,也就是第⑤型新生儿数量较少,是本研究新生儿免疫失败病例中的主要组成部分。本文使用HBIG的剂量是在对新生儿进行检测后确定的,用药原则是随着体内乙肝病毒抗原的量而增加剂量,这种针对性的用药方法在于安全、有效,抗-HBs在体内的作用主要是中和抗原,抗原越多所需的中和抗体就越多,所以临床使用剂量随之增加,未见有不良反应的出现。这一过程与急性乙型肝炎过程中乙肝病毒在体内被清除并不造成免疫变态反应损伤的临床过程相似。但如何更科学地按照新生儿体内的HBV量给予HBIG使其即有效又适量、如何对其效果进行动态监测及其不良反应等仍需做进一步的研究。结 论根据新生儿在宫内获得不同乙肝病毒标志物状况采取不同的免疫方法可进一步降低婴幼儿HBV母婴感染率。参考文献1、 Ohto H ,Lin H ,Kawana T ,et al . Intrauterine transmission of hapotitis B virus is closely related to placental leakage . Journal of the Medical Virology , 1987 , 21 (1) :1-6 .2、 阎永平,徐德忠,徐剑秋,等。乙型肝炎病毒宫内传播机制的分子流行病学研究。中华流行病学杂志,1998,19(3):131-133。3、 Badur S ,Lazizi Y , Ugurlu M ,et al . Transplacental passage of hepatitis B virus DNA from hepatitis B e antigen –negative mothers and delayed immune response in newborns . Jounal of the Infectious Disease , 1994 ,169:704 4、 .盛蕾,李民,张盛茹,等.乙肝免疫球蛋白和乙肝疫苗阻断乙肝病毒母婴传播32例. 医学导报,2000,19(2):133. 5、 岳亚飞,杨晓菊,张树林,等.乙肝表面抗原阳性孕妇肌注乙肝免疫球蛋白预防母婴传播的临床研究. 中国实用妇科与产科杂志,1999,15(9):547.6、 Centers for Disease Control and Prevention. Recommended childhood immunization schedule-United States,2000. Mor Mortal Wkly Rep,2000,49:35-38.
【摘要】目的:探索HBV感染者孕前治疗在阻断HBV母婴传播中的作用。方法:将孕前经过治疗的382例HBV感染者作为治疗组,对照组429例。按疗程使用免疫调节和(或)抗病毒治疗。结果:治疗组新生儿感染率低于对照组(P肝硬化或肝癌。乙肝疫苗的使用可以有效的控制乙肝病毒的母婴传播,但乙肝疫苗用在已经感染的新生儿往往会免疫失败。近年来许多研究报告了HBV感染孕妇于孕晚期使用乙肝免疫球蛋白可减少HBV的新生儿感染,也有学者报告孕期用HBIG起不到阻断HBV新生儿感染的作用。本文对382例HBV感染的女性于孕前进行免疫调节和(或)抗病毒治疗后怀孕,同期与没有治疗就已经怀孕的HBV感染者429例比较其新生儿的HBV感染情况,现将结果报告如下:材料与方法1 材料: 病例来自 1999年11月至2004年8月天津市传染病医院妇产科诊治的HBsAg阳性的产妇811例,平均年龄25.6±6.7(χ±)岁。2 方法2.1.1诊断标准 慢性HBsAg携带者和慢性乙型肝炎诊断标准依据2005年12月中华医学会肝病学分会及感染病学分会修订的“慢性乙型肝炎防治指南”。2.1.2新生儿宫内感染诊断 本文新生儿生后2小时左右取新生儿股静脉血检验乙肝标志物和HBVDNA,再于8月龄时复查,以HBsAg和(或)HBVDNA阳性为乙肝病毒感染诊断标准,以此判定孕前治疗对新生儿感染的影响。新生儿生后主、被动免疫方法无差异。2.2.3分组方法 孕前3~6个月进行抗病毒或免疫调节治疗组382例;孕前2~6个月未治疗只定期观察乙肝五项和HBV-DNA为对照组429例。两组病例初始检查乙肝标志物和HBV-DNA无差异。在3~6个月的治疗与观察过程中,HBV-DNA定量值下降>2log为病毒载量下降组,HBV-DNA定量值无降低或下降天津市传染病医院 张平 朱理珉 张玉荣 李伟 陈静 郝金玉 邮编3001922log但未转阴者为有效;HBV-DNA阴转为显效;HBV-DNA定量值无下降为无效。2.3检测方法 乙肝标志物检测试剂由华美公司提供,试验采用同位素法。(?)抗-HBc-IgM试剂由罗氏公司提供,试验采用酶联免疫法。HBV-DNA定量检测试剂由中山医科大学达安生物技术有限公司提供,采用PCR荧光定量法检测。2.4观察方法:慢性乙肝和慢性乙肝病毒携带者经过3个月的保肝治疗或观察,病毒载量也有不同程度的自然下降,本组将其分为病毒载量下降和无下降组,再将其各分为治疗组和对照组观察新生儿的感染情况。2.4资料统计学处理:卡方检验、精确卡方检验。3 结果各组新生儿HBV感染比较 (附表)病毒载量下降 病毒载量无下降对照组 治疗组 合计对照组 治疗组 合计孕妇例数 53 102 155 376 280 656新生儿感染数(例) 5 10 15 64 28 92新生儿感染率(%) 9.43 9.80 9.68 17.02 10 14.028月龄感染数(例) 0 0 0 9 0 98月龄感染率(%) 0 0 0 2.39 0 1.372.1病毒载量无下降患者的孕前治疗组与对照组的新生儿感染HBV比较c2=6.5617,p0.05。无统计学意义。2.3病毒载量无下降患者的孕前治疗组与病毒载量下降者的新生儿感染HBV比较c2=0.0019, p>0.05。无统计学意义。2.4病毒载量无下降患者的孕前对照组与病毒载量下降者的新生儿感染HBV比较c2=4.6741,p
HBV感染孕妇使用乙肝免疫球蛋白阻断母婴传播的作用观察(已在中华传染病杂志发表)【摘要】目的:观察HBV感染孕妇孕期使用乙肝免疫球蛋白(HBIG)在阻断乙肝病毒母婴传播中的作用。方法:将孕期没有使用HBIG的HBV感染孕妇作为对照组,与不同用法用量的HBIG 3组比较,以新生儿出生2小时静脉血检测HBsAg和HBVDNA结果为新生儿的感染指标。结果:对照组与各治疗组比较新生儿HBV感染率无差异,P>0.05。结论:孕期使用HBIG与新生儿感染HBV无关。关键词 乙肝病毒 乙肝免疫球蛋白【Abstract】purpose: It is searched whether HBIG can prevent HBV from mother to them neonate. Method: According of HBV-DNA and HBV-markers of neonate within 2 hours , the pregnant women that injected or not are divided into several groups to be studied. Result: There are not different with contrast in several groups about neonate HBV infection rate. Conclusion: Using HBIG to the pregnant women to prevent HBV infection to them fetus is not effective. Key word HBV HBIG乙肝病毒可以发生宫内感染己被证实,有关乙肝病毒宫内感染的诊断和阻断方法的研究目前尚无统一标准,现有的报告均以脐带血检测作为乙肝病毒宫内感染的诊断依据,其研究结果差异很大。以新生儿生后2 h内取静脉血检测乙肝病毒标志物和HBVDNA作为乙肝病毒宫内感染的诊断依据的研究尚少见报道。阻断乙肝病毒宫内感染的许多研究报告为孕期使用乙肝免疫球蛋白(HBIG),取得了很好的效果。随着对乙肝病毒的复制速度和复制量的研究,国内肝病学家对孕期使用HBIG的科学性和效果提出了质疑。本文研究观察孕期使用HBIG阻断新生儿感染HBV的效果并以新生儿静脉血检测作为乙肝病毒感染的诊断依据,结果报告下1 对象与方法 1.1 对象 2001年1月~2006年5月我院妇产科收治的乙肝病毒表面抗原阳性的产妇600例。治疗组438例,平均年龄25.6±6.7岁。对照组162例,平均天津市传染病医院 张平 张玉荣尤炜 国心 郝金玉 年龄25.1±6.6岁。慢性HBsAg携带者和慢性乙型肝炎诊断标准依据2005年12月中华医学会肝病学分会及感染病学分会修订的“慢性乙型肝炎防治指南”。1.2 方法1.2.1 治疗方法 治疗组438例孕妇产前行HBIG(上海生物制品研究所生产)阻断治疗。从孕28~32周开始,每月1次肌肉注射HBIG 200 U,用量在400~1200U。对照组162例产前未接受HBIG治疗。1.2.2 分组方法 将治疗组根据HBIG使用情况又分为Ⅰ孕期使用HBIG组166例。Ⅱ孕期未使用HBIG,产前2小时即刻使用HBIG200单位组144例。Ⅲ孕期及产前均使用HBIG组107例。对照组为始终未使用过HBIG组162例。1.2.3 观察方法 本组观察病例全部于其新生儿生后2小时取其静脉血检测HBsAg和抗-HBs,比较使用HBIG对其新生儿的影响。1.2.4 检测方法 HBsAg和抗-HBs使用电化学发光生化分析仪检测, 试由罗氏公司提供。1.2.5 统计学方法 数字统计用卡方检验。2 结果HBV感染孕妇使用HBIG方法及对其新生儿的影响比较见附表。 HBV感染数 孕妇新生儿HBsAg阳性数 新生儿抗-HBs阳性数 新生儿感染率(%) χ2值及p值对照组 162 19 0 11.73 Ⅰ组 166 23 0 13.85 χ2=0.3322 p>0.05治疗Ⅱ组 144 21 0 14.58 χ2=0.5468 p>0.05Ⅲ组 107 15 0 14.02 χ2=0.3061 p>0.05合 计 579 78 0 13.47 HBV感染孕妇使用HBIG方法及对其新生儿的影响比较 附表3 讨论过去一般认为产时和产后感染是母婴传播的主要途径,而宫内感染率较低为5%~15%[1]。但近年来研究发现宫内感染的发生并非人们所认为的那样低;据报道,乙肝表面抗原阳性孕妇引产的胎儿宫内感染率,血清学诊断为20.0%,胎肝组织HBV-DNA检测为44.4%,并认为HBV宫内感染是HBV传播的主要途径[2]。朱启镕报道了对HBsAg阳性的孕妇于孕第7、8、9三个月各注射HBIG200U,减少宫内感染获得成功。并提示宫内感染是生后免疫失败的主要原因[3]。就目前研究对乙肝病毒的宫内感染尚不能够明确定义,出生前的子宫内感染以及感染的时间和产时感染尚不能够区分,而胎儿或新生儿发生感染的时间和感染量决定了其感染的程度,这就提示我们将会根据新生儿的HBV感染程度采取不同的免疫方法,因而本文将新生儿出生后2小时内静脉血检验阳性结果称为新生儿HBV感染。本组观察乙肝表面抗原阳性的孕产妇600例,对其所产新生儿即刻检查股静脉血的HBsAg、HBeAg及HBV-DNA,由此来判断新生儿的HBV感染率。孕期未用HBIG组与个不同用法用量组相比较无统计学差异。于产前给孕妇使用HBIG的目的是中和乙肝病毒,张定风[4]报告了乙肝病毒在体内存活的时间为36.6h,病人体内的乙肝病毒日更新率为48%,由此可见病毒的复制量极大。从数量上HBIG的中和病毒作用和效果值得怀疑,本文研究结果提示HBIG可能没有起到中和病毒作用。结论:孕期使用乙肝免疫球蛋白与新生儿感染HBV无关。主要参考文献1.Sharma R,Malik A,Rattan,et al. Hepatitis B virus infection in pregnant woman and its transmission to infants. J Trop Pediatr, 1996;42:352-354. 2.阎永平,徐德忠,王文亮,et al. The relationship study between placenta infection and intrauterine transmission of HBV. JMed coll PLA, 1998;13:191-195.3.朱启镕,吕晴,俞葸 等 宫内感染HBV婴儿接种乙肝疫苗免疫失败的机理和预后研究. 中华儿科杂志. 1997.7;(35):7:349-3524.张定风 从机体清除乙肝病毒的规律,探讨抗病毒治疗的新策略 2001年全国肝脏疫病学术研讨会. 2001.5.5 中国厦门